產(chǎn)品簡介:
雙螢光素酶報告基因檢測試劑盒為檢測基因的表達(dá)量提供有效的手段,在DLR 檢測中,螢火蟲螢光素酶(Firefly luciferase)和海腎螢光素酶(Renilla luciferase)的活性可在單個樣品中依次檢測。先以螢光素(Luciferin)為底物來檢測螢火蟲螢光素酶的活性,然后加入抑制螢火蟲螢光素酶催化的物質(zhì),同時加入腔腸素(Coelenterazine)檢測海腎螢光素酶的活性,實現(xiàn)雙螢光素酶報告基因檢測。通過螢光素酶和其底物這一生物發(fā)光體系,可以非常靈敏、高效地檢測基因的表達(dá)。通常把感興趣基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控元件或 5' 啟動子區(qū)克隆在Luciferase 的上游,或把3'-UTR 區(qū)克隆在Luciferase 的下游,構(gòu)建成報告基因(Reporter gene)質(zhì)粒,然后轉(zhuǎn)染細(xì)胞,用適當(dāng)藥物等處理細(xì)胞后裂解細(xì)胞,通過檢測螢光素酶活性的高低來判斷藥物處理等對目的基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控作用。海腎螢光素酶更多地被用作檢測轉(zhuǎn)染效率的內(nèi)參,以消除細(xì)胞數(shù)量和轉(zhuǎn)染效率的差異。
螢火蟲螢光素酶催化luciferin發(fā)光的最強(qiáng)發(fā)光波長為560nm。海腎螢光素酶催化coelenterazine發(fā)光的最強(qiáng)發(fā)光波長為465nm。
產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn):
本試劑盒的光信號可以通過化學(xué)發(fā)光儀、酶標(biāo)儀或液閃測定儀進(jìn)行測定。該試劑盒具有檢測迅速、靈敏度高、檢測范圍廣,無細(xì)胞內(nèi)源活性干擾等特點(diǎn)。