■ 產(chǎn)品介紹
EPI300細(xì)胞含有一個(gè)突變的trfA基因，該基因表達(dá)出的蛋白產(chǎn)物可以促進(jìn)含有ori V復(fù)制子的質(zhì)粒的高拷貝擴(kuò)繁，誘導(dǎo)劑Ⅰ可以誘導(dǎo)trfA基因的表達(dá)。當(dāng)含有ori V復(fù)制子質(zhì)粒的EPI300細(xì)胞在LB/2YT或SOB培養(yǎng)基中生長(zhǎng)時(shí)，trfA基因的表達(dá)被抑制，ori V復(fù)制子質(zhì)粒的拷貝數(shù)維持在很低的水平；當(dāng)在培養(yǎng)基中加入誘導(dǎo)劑Ⅰ，ori V復(fù)制子質(zhì)粒的拷貝數(shù)可維持在很高的水平，提高了質(zhì)粒產(chǎn)量。因此EPI300菌株可以降低ori V復(fù)制子質(zhì)粒的拷貝數(shù)，特別適合于各種不穩(wěn)定 DNA 或毒性基因的克隆。 [mrr-hsdRMS-mcrBC]基因型使EPI300菌株適合于克隆富含甲基胞嘧啶或甲基腺嘌呤的DNA（例如：哺乳動(dòng)物基因組DNA）。recA1和endA1的突變有利于插入DNA的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒DNA的提取。lacZΔM15 標(biāo)記的存在使EPI300可用于藍(lán)白斑篩選，rpsL賦予其鏈霉素抗性。 |
基因型： | F- mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) Φ80dlacZΔM15 ΔlacX74 recA1 endA1 araD139 Δ(ara, leu)7697 galU galK λ- rpsL (StrR) nupG trfA dhfr |
■ 基本信息
抗性: | 硫酸鏈霉素（Str） |
培養(yǎng)基: | LB |
菌株類別: | 大腸桿菌 |
培養(yǎng)條件: | 37℃，有氧，LB |
質(zhì)粒轉(zhuǎn)化: | 42℃熱激 |
保存方式: | 20%甘油，-80℃ |
基本應(yīng)用: | 用于基因克隆 |
■ 使用方法
建議超凈臺(tái)內(nèi)劃線涂板，得到單克隆后再進(jìn)行其他實(shí)驗(yàn)操作，避免雜菌污染。
■ 注意事項(xiàng)
1. 本產(chǎn)品僅可用于實(shí)驗(yàn)室研究，不能用于動(dòng)物，人體以及作為食品添加劑等用途。
2. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
3. 使用甘油菌時(shí)可不完全融解，在甘油菌表面蘸取少量涂布固體瓊脂平板即可，也可完全融解后使用，但隨著凍融次數(shù)的增加，菌株的活力會(huì)逐漸下降。
